Purification Ausrüstung fir Oligo Purification

1. Gel Electrophoresis Chromatography Purification
Benotzt denaturéierend Polyacrylamid Gel Elektrophoreseschromatographie fir d'Rengung.Den Denaturéierungsmëttel ass allgemeng 4M Formamid oder 7M Harnstoff, d'Konzentratioun vun Acrylamid ass tëscht 5-15%, an den Undeel vu Methacrylamid ass haaptsächlech tëscht 2-10%.
No der Elektrophorese muss d'Positioun vun der Nukleinsäureband ënner der Bestrahlung vun ultravioletem Liicht festgeluegt ginn, de Gel deen d'Zilnukleinsäure enthält gëtt ofgeschnidden, d'Nukleinsäure gëtt zerstéiert a geläscht, an dann ass d'Léisungsléisung konzentréiert, entsalt, quantifizéiert a lyophiliséiert.

2. DMT-On, HPLC Purification
Wielt den DMT-On Modus während der Synthese, de Rohprodukt gouf centrifugéiert a bei Raumtemperatur konzentréiert fir iwwerschësseg Ammoniak no der Aminolyse ze entfernen.
D'Trennung gouf mat enger C18 Kolonn mat Acetonitril an 10% Triethylamin-Essigsäure (TEAA) als Eluent gemaach.Nodeems d'Elutioun ofgeschloss ass, gëtt se konzentréiert, an dann gëtt d'DMT-Grupp mat Trifluoracetic Seier ewechgeholl.No der Neutraliséierung ginn e puer Salzer a kleng Moleküle duerch e ofgeschniddene Rouer ewechgeholl, a schliisslech entsalt.

Dës Method kann e Produkt mat méi héijer Rengheet kréien, awer et ass néideg op d'Optriede vun der Depurinatioun oppassen.

3. DMT-Off, HPLC Purification
Wielt den DMT-Off während der Synthese, an de Rohprodukt gouf centrifugéiert a bei Raumtemperatur konzentréiert fir iwwerschësseg Ammoniak no der Ammonolyse ze entfernen.
D'Trennung gouf mat enger C18 Kolonn mat Acetonitril an 10% Triethylamin-Essigsäure am Waasser als Eluent duerchgefouert.Nodeems d'Trennung ofgeschloss a quantifizéiert ass, ginn d'Alquote lyophiliséiert.

Dës Method erfuerdert virsiichteg Upassung vun Trennungsbedéngungen, a kann och relativ reng Zilmoleküle kréien.