An der typescher DNA, RNA an net-natierlechen Nukleinsäuren Synthese spillt den Entschutz- a Kupplungsschrëtt entscheedend Rollen.
Den Deprotection Schrëtt ass d'DMT Grupp op der zolitter Ënnerstëtzung oder der 5' Hydroxylgrupp op der viregter Nukleosid mat organescher Säure ze läschen, an d'Hydroxylgrupp fir de folgende Kupplungsschrëtt ausgesat.Déi 3% Trichloracetic Seier am Dichloromethan oder Toluen gëtt meeschtens benotzt fir den Entschutzschrëtt auszeféieren.D'Konzentratioun vun Trichlorättiksäure an d'Entschutzzäit (Deblockéierungszäit) dominéieren d'Rengheet vun den Endprodukter.Niddereg Konzentratioun an net genuch Deblocking Zäit léisst onreagéiert DMT Grupp, déi d'Ausbezuelung erofsetzen an déi ongewollt Gëftstoffer erhéijen.Déi laang Deblockéierungszäit kann d'Depurin vu synthetiséierte Sequenzen féieren, déi onerwaart Gëftstoffer bilden.
De Kupplungsschrëtt ass empfindlech op de Waassergehalt vu Léisungsmëttelen an d'Feuchtigkeit an der Loft.D'Konzentratioun vum Waasser an der Synthese soll manner wéi 40 ppm sinn, besser manner wéi 25 ppm.Fir den Waasserfräi Synthesekonditioun ze halen, sollt d'Synthese vun den Nukleinsäuren an engem Ëmfeld mat niddereger Fiichtegkeet duerchgefouert ginn, sou datt mir eise Client recommandéieren deAmidites opgeléist Equipement, wat de pulveriséierte oder ueleg Phosphoramidit am Waasserfräi Acetonitril opléise kann fir Kontakt mat der Loft ze vermeiden.
Zënter der Opléisung vu Phosphoramiditen ass et besser an der Net-Waasser Situatioun, a molekulare Fallen fir d'Spuerwaasser an de Reagenser an Amidit ze adsorbéieren, ass et néideg fir d'Virbereedung vun derMolekulare Fallen.Mir recommandéieren 2 g Subsief fir 50-250ml Reagensfläschen, 5g fir 250-500ml Reagensfläschen, 10g fir 500-1000ml Reagensfläschen, an 20g fir 1000-2000ml Reagensfläschen.
D'Opléisung vu Phosphoramiditen soll ënner der inert Atmosphär duerchgefouert ginn, an d'Ersatz vun Aktivatorreagenz an Acetonitril soll an der Zäit fäerdeg sinn.D'Capping- an Oxidatiounsreagenz solle sou séier wéi méiglech benotzt ginn, déi opgemaachte Reagenz gi manner Haltbarkeet a manner Aktivitéit während der Synthese.
Post Zäit: Aug-09-2022